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乳鐵蛋白

乳鐵蛋白(Lactoferrin)它是一種轉(zhuǎn)鐵蛋白,是一種非血紅素鐵結(jié)合糖蛋白。乳鐵蛋白主要產(chǎn)生于哺乳動(dòng)物的腺上皮細(xì)胞和中性粒細(xì)胞中,廣泛存在于哺乳動(dòng)物的生物體液中,具有運(yùn)輸和儲(chǔ)存鐵離子的功能、抗菌抗病毒和免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用。提取乳鐵蛋白的常用方法是鹽析法、透析法、超濾法、色譜法和磁分離法是主要方法;檢測(cè)乳鐵蛋白有物理和化學(xué)分析方法、免疫分析和生物電化學(xué)等。乳鐵蛋白具有許多活性功能,這使得它在食品中很有用、化妝品、醫(yī)藥畜牧等領(lǐng)域都有很多應(yīng)用。

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目錄

發(fā)現(xiàn)歷史 編輯本段

1939年,丹麥科學(xué)家索倫森(Sorensen)人們?cè)趶呐D讨蟹蛛x乳清蛋白時(shí),首次發(fā)現(xiàn)了這種新型蛋白質(zhì)。因?yàn)檫@種蛋白質(zhì)是紅色的,所以被稱(chēng)為“牛奶的紅色部分”The red part of milk)1960年,瑞典科學(xué)家約翰遜(Johansen)其他人從母乳中分離出這種蛋白質(zhì);次年,法國(guó)科學(xué)家勃朗(Blanc)以及其他人再次分離純化這種蛋白質(zhì),并命名為“乳鐵蛋白”

分布情況 編輯本段

乳鐵蛋白主要由哺乳動(dòng)物黏膜上皮細(xì)胞合成和分泌,廣泛存在于真皮黏膜中、中性粒細(xì)胞和外部分泌物(如眼淚、唾液、精液等)在大多數(shù)生物體液中,例如。

物質(zhì)結(jié)構(gòu) 編輯本段

分子結(jié)構(gòu)

乳鐵蛋白是由約700個(gè)氨基酸組成的多肽鏈,具有生物學(xué)作用機(jī)制。該鏈的三維結(jié)構(gòu)由兩條高度同源的、結(jié)構(gòu)相似的葉片被長(zhǎng)鏈纏繞(N-葉和C-葉)N-葉和C-葉結(jié)構(gòu)分別含有氨基酸1~332和氨基酸344~703雙葉在鉸鏈區(qū)結(jié)構(gòu)連接,質(zhì)量均衡。N-葉和C-葉片內(nèi)部結(jié)構(gòu)通過(guò)α-螺旋和β-折疊聚合后,進(jìn)一步分為N1、N2域和C1、C2結(jié)構(gòu)域。C-葉比N-葉子帶較少的正電荷。經(jīng)研究表明,N-葉片結(jié)構(gòu)與提高乳鐵蛋白的抗菌活性有關(guān),而c-葉片結(jié)構(gòu)有利于某些疾病的治療。

乳鐵蛋白有兩個(gè)金屬離子結(jié)合位點(diǎn),每個(gè)位點(diǎn)含有一個(gè)天冬氨酸、一個(gè)組氨酸和兩個(gè)酪氨酸。因此,它能可逆地結(jié)合鐵?離子和CO? ?離子。因?yàn)樗c鐵離子的絡(luò)合物是紅色的,乳鐵蛋白也有“紅蛋白”之稱(chēng)。

聚合形式

乳鐵蛋白在生物體液中主要以單體和聚合的形式存在。其聚合形式是由于鈣依賴(lài)的自聚,可分為二聚體形式、三聚體形式和四聚體形式,其中四聚體是最重要的形式。

理化性質(zhì) 編輯本段

表面帶有正電荷

乳鐵蛋白表面的正電荷是其重要特性之一,可以驅(qū)動(dòng)乳鐵蛋白與陰離子化合物結(jié)合。乳鐵蛋白表面的正電荷位點(diǎn)分布在兩個(gè)地方,第一個(gè)是小葉間帶正電荷的位點(diǎn),第二個(gè)是N1結(jié)構(gòu)域的第一個(gè)α-螺旋的兩個(gè)區(qū)域。

鐵結(jié)合性能

轉(zhuǎn)鐵蛋白和乳鐵蛋白是哺乳動(dòng)物中最重要的兩種轉(zhuǎn)鐵蛋白,可與鐵結(jié)合,但前者的鐵親和力僅為0.33%~0.40%根據(jù)乳鐵蛋白結(jié)合鐵離子的多少,可以分為三種:鐵飽和乳鐵蛋白、半飽和乳鐵蛋白和飽和無(wú)鐵乳鐵蛋白。(    )211211)

穩(wěn)定性

乳鐵蛋白穩(wěn)定性好,主要體現(xiàn)在短時(shí)間內(nèi)不受溫度影響。發(fā)現(xiàn)溫度短時(shí)間保持在72 ℃或1353356℃(8~20 s)其鐵結(jié)合能力基本不受影響;然而,當(dāng)保溫處理進(jìn)行較長(zhǎng)時(shí)間時(shí),鐵結(jié)合能力降低。

熱變性

乳鐵蛋白的熱變性程度取決于與鐵離子的結(jié)合程度。其中飽和乳鐵蛋白的熱變性溫度最高,無(wú)鐵乳鐵蛋白的熱變性溫度最低。進(jìn)一步研究表明,乳鐵蛋白不僅能與鐵離子結(jié)合,還能與銅結(jié)合、錳、鋅等離子結(jié)合。

生物學(xué)功能 編輯本段

抗微生物作用

抗菌性

抗菌蛋白和抗菌肽是抵御細(xì)菌入侵的第一道防線(xiàn)。乳鐵蛋白作為一種抗菌蛋白,具有優(yōu)異的鐵結(jié)合能力,可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng),干擾細(xì)胞膜的形成,進(jìn)而阻礙細(xì)菌粘附、阻止細(xì)菌進(jìn)入細(xì)胞的功能。乳鐵蛋白還能產(chǎn)生帶正電荷的抗菌肽,中和帶負(fù)電荷的磷脂和脂多糖,改變病原微生物細(xì)胞膜物質(zhì)的種類(lèi)和流速,破壞其生理功能,產(chǎn)生抗菌作用。

乳鐵蛋白還可以調(diào)節(jié)腸道菌群。在嬰幼兒配方乳粉中添加乳鐵蛋白,可以促進(jìn)腸胃功能的加強(qiáng),提高嬰幼兒的免疫力。乳鐵蛋白能產(chǎn)生具有抗菌活性的肽,但受環(huán)境pH值變化的影響,從而影響乳鐵蛋白的抗菌效果,影響程度與細(xì)菌種類(lèi)有關(guān)。對(duì)于革蘭氏陽(yáng)性菌,乳鐵蛋白的抑制效果受pH值的變化影響較大當(dāng)pH值為7時(shí).5~8.0抑菌效果最好。此外,70 ℃以下巴氏殺菌后乳鐵蛋白的抗菌活性基本不受影響,增加HCO ?濃度有助于增強(qiáng)其抗菌活性。

抗真菌、寄生蟲(chóng)作用

已知乳鐵蛋白與許多病原微生物相互作用。鐵作為生物體不可缺少的元素,參與許多重要的生命活動(dòng)。病原微生物也需要攝取鐵。乳鐵蛋白具有優(yōu)異的鐵結(jié)合能力,能競(jìng)爭(zhēng)微生物的鐵源,促進(jìn)機(jī)體 對(duì)病原微生物的防御能力。乳鐵蛋白抵抗病原微生物的機(jī)制有很多,包括抑制生物膜形成、抑制病毒復(fù)制、粘附病原微生物等。

抗病毒作用

乳鐵蛋白及其功能肽在抗病毒方面也有重要作用。乳鐵蛋白及其功能肽可以通過(guò)將包涵體病毒或裸病毒包裹起來(lái)而阻止其進(jìn)入細(xì)胞。乳鐵蛋白還可以通過(guò)直接附著在病毒顆粒上來(lái)抑制病毒侵入細(xì)胞。

乳鐵蛋白作為轉(zhuǎn)鐵蛋白家族的一員,也是防御病原菌的主要成員,也被證明對(duì)多種病毒有抑制作用。其中包括人類(lèi)皰疹病毒、腺病毒、輪狀病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒對(duì)生物醫(yī)學(xué)和人類(lèi)免疫研究具有重要價(jià)值。

腺病毒

通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)普通糖胺聚糖受體并與病毒結(jié)構(gòu)多肽特異性相互作用

腸道病毒(EV71 and Echo Virus 6)

通過(guò)阻止病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,可以發(fā)揮其抗腸道病毒的活性;防止病毒的復(fù)制

皰疹病毒

由皰疹病毒受體硫酸乙酰肝素與LF結(jié)合介導(dǎo)

抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用

抗炎活性

在炎癥初期,乳鐵蛋白直接促進(jìn)肉芽組織的形成和再上皮化,促進(jìn)皮膚的傷口愈合,顯示其抗炎活性。乳鐵蛋白通過(guò)刺激成纖維細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞增殖并遷移至創(chuàng)面,促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)成分的合成,并能有效清除炎癥時(shí)的鐵離子和自由基,從而達(dá)到抗炎的目的。

免疫調(diào)節(jié)活性

在免疫過(guò)程中,乳鐵蛋白與入侵細(xì)菌的表面受體結(jié)合,控制其入侵體細(xì)胞。通過(guò)直接螯合鐵,還可以調(diào)節(jié)主要的鐵相關(guān)蛋白,達(dá)到鐵清除劑的作用。

乳鐵蛋白可以刺激和調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)。乳鐵蛋白是先天免疫系統(tǒng)的重要組成部分。當(dāng)革蘭氏陰性菌進(jìn)入宿主后,微生物會(huì)接觸到免疫系統(tǒng)中的多種蛋白質(zhì)。細(xì)胞壁上產(chǎn)生的細(xì)菌脂多糖(lipopolysaccharide)是細(xì)菌表面許多噬菌體的吸附受體。革蘭氏陰性菌釋放的LPS會(huì)與多種結(jié)合分子相互作用,發(fā)揮免疫刺激作用。乳鐵蛋白是LPS高親和力結(jié)合的候選蛋白之一。

乳鐵蛋白能激活巨噬細(xì)胞的細(xì)胞因子,刺激b、T淋巴細(xì)胞使未成熟的樹(shù)突細(xì)胞成熟,從而增強(qiáng)它們刺激抗原特異性T細(xì)胞的能力。

酶活性

由于乳鐵蛋白的部分序列與核糖核酸酶高度相似,乳鐵蛋白也可以作為酶,在反應(yīng)中起到催化作用,但其酶活性受鐵結(jié)合量的影響。

促鐵轉(zhuǎn)運(yùn)作用

乳鐵蛋白負(fù)責(zé)在生物體內(nèi)運(yùn)輸鐵離子。通過(guò)負(fù)反饋的調(diào)節(jié)機(jī)制,當(dāng)細(xì)胞缺鐵時(shí),細(xì)胞表面的乳鐵蛋白特異性受體會(huì)增加,與乳鐵蛋白的結(jié)合量增加。

促進(jìn)骨骼的生長(zhǎng)活性

乳鐵蛋白對(duì)骨骼生長(zhǎng)活性的影響主要體現(xiàn)在以下兩點(diǎn):對(duì)于成骨細(xì)胞,具有強(qiáng)大的增殖和抗凋亡作用;對(duì)于破骨細(xì)胞,會(huì)有抑制作用。

應(yīng)用現(xiàn)狀 編輯本段

食品領(lǐng)域

基于其抗菌原理,乳鐵蛋白可用作食品中的天然防腐劑。另外,乳鐵蛋白是酸奶、脫脂乳、許多產(chǎn)品如保健食品和發(fā)酵乳制品的主要成分之一。同時(shí),由于母乳中含有較多的乳鐵蛋白,在嬰兒配方奶粉中人工添加,可以使奶粉的成分更接近母乳,促進(jìn)嬰兒鐵的吸收,進(jìn)一步提高嬰兒的抵抗力,預(yù)防敗血癥。

化妝品領(lǐng)域

除了抗炎、除了抗菌,研究表明乳鐵蛋白還能促進(jìn)人體膠原蛋白的形成,抑制黑色素的產(chǎn)生,因此乳鐵蛋白在化妝品領(lǐng)域可以作為安全的皮膚增白劑廣泛添加到各種產(chǎn)品中。

醫(yī)藥領(lǐng)域

乳鐵蛋白的抗菌作用、消炎、抗病毒功能,可用于口腔治療、微生物感染的預(yù)防和治療。此外,還可用于預(yù)防嬰兒胃腸道感染,減少新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎,輔助治療干眼癥,甚至防治神經(jīng)退行性疾病。

畜牧業(yè)領(lǐng)域

乳鐵蛋白可用作營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑,添加到動(dòng)物飼料中,提高動(dòng)物的生長(zhǎng)性能和免疫力。乳鐵蛋白無(wú)毒無(wú)副作用,是一種綠色健康的飼料添加劑。

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